[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 15، شماره 4 - ( 10-1400 ) ::
جلد 15 شماره 4 صفحات 55-47 برگشت به فهرست نسخه ها
بیوتکنولوژی انتقال ژن در ماهی زبرا به عنوان مدل تحقیقاتی انتقال ژن در آبزیان پرورشی
شیرین جمشیدی*، اشکان بنان
انستیتو تحقیقات بین الملی ماهیان خاویاری
چکیده:   (163 مشاهده)
جهت ایجاد ماهی رنگی زینتی زبرا، واکنش زنجیره­ای پلیمراز (PCR) با استفاده از آغازگرهای طراحی شده برای پیشبر دو ژن انتخاب شده در سلول­های عضلاتی و همسانه­سازی این قطعات ژنی در وکتور Tol2 که خود حاوی ژن پروتئین فلوئورسنت سبز (GFP) بود در ناحیه خوانش باز (ORF) صورت گرفت. به ترتیب قطعات 2000 و 2300 جفت بازیِ ناحیه پیشبر ژن­های MYLZ2 و CKMB بوسیله واکنش زنجیره­ای پلیمراز تکثیر شده، در وکتور بیانی Tol2 دارای جایگاه برشی آنزیم SalI همسانه­سازی شد و به باکتری اشریشیاکلی (E. coli) سویه Dh5α انتقال یافت. همسانه­های مثبت توسط colony PCR با استفاده از آغازگرها مورد بررسی قرار گرفت و برای استخراج پلاسمید نوترکیب کشت شد. پلاسمید نوترکیب استخراج شده توسط هضم آنزیمی SalI بررسی شد و به کمک آغازگرهای عمومی تعیین توالی گردیدند. در این مطالعه، به ترتیب قطعات 2000 و 2300 جفت بازیِ راه انداز ژن­های MYLZ2 و CKMB در وکتور بیانی Tol2 همسانه­سازی شدند که تایید آن با استفاده از واکنش زنجیره­ای پلیمراز، توالی­یابی و هضم آنزیمی صورت گرفت. همچنین، پلاسمید نوترکیب کشت داده شد و برای تزریق به همراه یک رونوشت سنتتیک خالص­سازی گردید. جنین­های تک سلولی تزریق شده (توسط پلاسمید نوترکیب و رونوشت) به وسیله میکروسکوپ فلوئورسنس برای بررسی بیان GFP آزمایش شدند و مشخص شد که بیان GFP در سلول­های عضلانی برخی از نتاج نسل F0 روی داده است. پلاسمیدهای نوترکیب شده با استفاده از پیشبرهای مختص سلول­های عضلانی (MYLZ2 و CKMB) قادر به القاء بیان GFP در برخی از جنین­های نسل F0 به صورت موقت بودند و از این رو می توانند جهت تثبیت بیان در نسل­های بعدی ماهی استفاده شوند.
واژه‌های کلیدی: همسانه‌سازی، ماهی زبرا تراریخت رنگی، وکتور Tol2 نوترکیب، رونوشت
متن کامل [PDF 837 kb]   (64 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: تخصصي
دریافت: 1398/9/23 | پذیرش: 1398/11/4 | انتشار: 1400/10/10
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Jamshidi ُ, Banan A. Gene transfer biotechnology in zebrafish as a gene transfer research model in farmed aquatic animals. 3. 2021; 15 (4) :47-55
URL: http://aqudev.liau.ac.ir/article-1-677-fa.html

جمشیدی شیرین، بنان اشکان. بیوتکنولوژی انتقال ژن در ماهی زبرا به عنوان مدل تحقیقاتی انتقال ژن در آبزیان پرورشی. نشریه توسعه آبزی پروری. 1400; 15 (4) :55-47

URL: http://aqudev.liau.ac.ir/article-1-677-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 15، شماره 4 - ( 10-1400 ) برگشت به فهرست نسخه ها
نشریه توسعه آبزی پروری Journal of Aquaculture Development
Persian site map - English site map - Created in 0.04 seconds with 30 queries by YEKTAWEB 4343